液相色譜儀的工作原理

更新時(shí)間：2019-09-06

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液相色譜儀工作原理：高壓泵將貯液罐的流動(dòng)相經(jīng)進(jìn)樣器送入色譜柱中，然后從檢測器的出口流出，這時(shí)整個(gè)系統(tǒng)就被流動(dòng)相充滿。當(dāng)欲分離樣品從進(jìn)樣器進(jìn)入時(shí)，流經(jīng)進(jìn)樣器的流動(dòng)相將其帶入色譜柱中進(jìn)行分離，分離后不同組分依先后順序進(jìn)入檢測器，記錄儀將進(jìn)入檢測器的信號記錄下來，得到液相色譜圖。
液相色譜儀法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上，引用了氣相色譜的理論，在技術(shù)上，流動(dòng)相改為高壓輸送，色譜柱是以殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜（每米塔板數(shù)可達(dá)幾萬或幾十萬），同時(shí)柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進(jìn)行連續(xù)檢測。
一般在使用時(shí)注意：
1、在用紫外吸收檢測器時(shí)，所用流動(dòng)相應(yīng)符合紫外分光光度法項(xiàng)下對溶劑的要求。
2、各品種項(xiàng)下規(guī)定的條件除固定相種類、流動(dòng)相組分、檢測器類型不得任意改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動(dòng)相流速、混合流動(dòng)相各組分的比例、柱溫、進(jìn)樣量、檢測器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變。
3、一般色譜圖約于20分鐘內(nèi)記錄完畢，以適應(yīng)具體品種并達(dá)到系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。
4、如所用流動(dòng)相為含鹽流動(dòng)相，反相色譜柱使用后，先用水或低濃度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇沖洗。
5、不要在高溫下長時(shí)間使用硅膠鍵合相色譜柱。
6、流動(dòng)相應(yīng)選用色譜試劑、高水或雙蒸水，酸堿液及緩沖液需經(jīng)過濾后使用，過濾時(shí)注意區(qū)分水系膜和油系膜的使用范圍。
7、水相流動(dòng)相需經(jīng)常更換（一般不超過2天），防止長菌變質(zhì)。